人NKT细胞淋巴瘤细胞的处理办法与培育过程!

人NKT细胞淋巴瘤细胞的处理办法与培育过程!

作者:行业新闻    来源:行业新闻    发布时间:2023-12-06 06:54:14    浏览量:

  NK/T cell lymphoma)是起源于老练NK/T细胞的淋巴体系恶性肿瘤。NK细胞和T细胞具有一起的祖细胞,两者在功用和某些抗原的表达上具有相似之处,NK/T细胞淋巴瘤因起源于这两种细胞而得名。

  留意事项:仅用于科学研究或许工业使用等非医疗意图不行用于人类或动物的临床确诊或医治,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

  细胞在培育瓶中培育至杰出状况后灌满彻底培育液并封好瓶口是细胞运送的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用

  75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严厉无菌操作,培育箱静置 2-4 小时。镜下调查:未超越 80%汇合度时,可将瓶装的彻底培育液搜集至离心管中,参加 6ml 彻底培育基,放入 37℃、5%CO2 孵箱培育;超越 80%汇合度时,根据状况传代或许冻存,具体操作见细胞培育过程。(留意发货的是密封培育瓶的话,放入培育箱培育记住培育瓶盖子拧松)

  1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中敏捷摇晃冻结,参加 5mL 培育基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 4-6mL 彻底培育基后吹匀。然后将一切细胞悬液参加培育瓶中培育过夜(或将细胞悬液参加 6cm 皿中),培育过夜。第二天换液并检查细胞密度。

  1、细胞成长至掩盖培育瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培育瓶中的培育液,用 PBS 清洗细胞一次;

  2、增加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培育瓶中,倒置显微镜下调查,待细胞回缩变圆后参加彻底培育液停止消化,悄悄吹打细胞使之掉落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;

  2、加 1-2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培育瓶中,置于 37℃培育箱中消化1-2min,然后在显微镜下调查细胞消化状况,若细胞大部分变圆并掉落,敏捷拿回操作台,轻敲几下培育瓶后加 5ml 以上含 10%血清的彻底培育基停止消化。

  3、悄悄吹打细胞,彻底掉落后吸出,在 1000RPM 条件下离心 8-10 分钟,弃去上清液,补加1-2mL 培育液后吹匀。

  4、按 5-6ml/瓶补加培育液,将细胞悬液按 1:2 的份额分到新的含 5-6 ml 培育液的新皿中或许瓶中。

  PS:若客户收到 2ml 小管细胞,收到细胞后,用 75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严厉无菌操作;将小管细胞转移至 T25 培育瓶或 6cm 培育皿,参加 5ml 左右彻底培育基混匀,放入培育箱过夜培育后检查细胞密度:若密度未超越 80%,换液持续培育,视状况传代或许冻存。若密度超越 80%,可直接进行传代(办法同上)。

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